驚！葡聚糖凝膠竟然可以在有機(jī)溶劑中使用？

簡介

Tandex LH-20是在葡聚糖凝膠Tandex G-25的基礎(chǔ)上經(jīng)羥丙基化處理后得到的產(chǎn)物，不僅可在水中應(yīng)用，也可在極性有機(jī)溶劑或他們與水組成的混合溶劑中膨潤使用，適合中藥有效成分的分離純化以及抗生素和化學(xué)藥物的精細(xì)純化。

原理

Tandex LH-20的分離原理主要有兩方面：以凝膠過濾作用為主，兼具反相分配的作用（在反相溶劑中）。因?yàn)槟z過濾作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脫下來，小分子的化合物保留強(qiáng)，最后出柱。如果使用反相溶劑洗脫，Tandex LH-20對化合物還起反相分配的作用，所以極性大的化合物保留弱，先被洗脫下來，極性小的化合物保留強(qiáng)，后出柱。如果使用正相溶劑洗脫，這主要靠凝膠過濾作用來分離。

溶劑系統(tǒng)

Tandex LH-20常選用單一的溶劑系統(tǒng)，應(yīng)用最多的是極性強(qiáng)弱不同的如下五種：水、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷。根據(jù)溶劑極性的不同，樣品分別發(fā)生正相或反相分配作用。

除水以外，甲醇是多年來一直使用的極性*的流動(dòng)相。當(dāng)甲醇作為流動(dòng)相時(shí)，Tandex LH-20的保留行為：芳香族化合物＞脂環(huán)族化合物＞脂肪族化合物。甲醇作為流動(dòng)相的另一個(gè)特點(diǎn)是：對不同芳香族化合物可選擇性保留，這取決于苯環(huán)上存在的官能團(tuán)及雜原子性質(zhì)、數(shù)目和位置。苯環(huán)上存在的官能團(tuán)及雜原子減弱了苯環(huán)本身的性質(zhì)。苯環(huán)上所帶的OH-越多，極性越強(qiáng)，在Tandex LH-20上滯留的時(shí)間越長。堿性物質(zhì)比酸性或中性物質(zhì)在Tandex LH-20上滯留的時(shí)間更長。

樣品的處理和洗脫溶劑的選擇

如果樣品極性大，選用反相溶劑洗脫（甲醇-水），樣品用最少體積的甲醇-水（盡可能甲醇少一些）溶解，過濾后，濕法上樣（必須要進(jìn)行過濾，否則造成Tandex LH-20堵塞后，就必須將葡聚糖凝膠LH-20的柱頭部分棄去，造成不必要的浪費(fèi)）。如果樣品極性小，選用正相溶劑洗脫（氯仿-甲醇），樣品用最少體積的氯仿-甲醇溶解，過濾后，濕法上樣。

葡聚糖凝膠LH-20的分離技巧

1.流速要控制好，流速不可太快，為了快加壓，分子篩效果會降低：過慢會導(dǎo)致樣品在柱子擴(kuò)散嚴(yán)重，達(dá)不到分離效果。

2.柱子盡可能長，Tandex LH-20柱長的增加將極大地改善分離，所以不要吝惜填料，寧可將填料全裝在一根大柱子中，不要將填料裝成幾根小柱。

3.餾分一定要接的細(xì)，可1/10，或1/20個(gè)保留體積接成一餾分。

4.洗脫體積一般為2-3個(gè)保留體積，對特殊保留強(qiáng)的化合物，可洗脫5個(gè)保留體積。

5.如果黃酮類化合物粗提物中有鞣質(zhì)，那么你就要小心了，Tandex LH-20對鞣質(zhì)幾乎是死吸附的。如果不考慮填料，可用Tandex LH-20分鞣質(zhì)。

6.填料可反復(fù)使用，每次用完，可用甲醇將柱子洗干凈，然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來。

注意事項(xiàng)

1.上樣之前，樣品必須經(jīng)過膜過濾及去除色素，否則雜質(zhì)及色素會被吸附到填料上，影響填料的正常使用。

2.在使用過程中，避免使用高濃度的強(qiáng)酸強(qiáng)堿，酸和堿的濃度應(yīng)低于0.15摩爾。堿會使流速變慢。

3.不同的樣品，吸附和洗脫方法不相同，可以根據(jù)相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行。

性能參數(shù)

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