HILIC親水作用模式知多少？

小伙伴們平時使用最多的就是反相色譜柱（RPC）和正相色譜柱（NPC），當我們遇到化合物在正相模式下強保留，在反相模式下不保留或保留很弱的情況時該怎么選擇色譜柱呢？

相信小伙伴們的第一反應(yīng)是用HILIC色譜柱，那今天小編就和大家分享一下親水模式色譜柱的作用機理和日常維護，希望對大家有所幫助。

HILIC柱也叫親水作用色譜柱，是正相色譜柱的一種變化，即固定相是極性填料，使用的流動相是甲醇、乙腈、水等極性溶劑。極性物質(zhì)在親水作用色譜里優(yōu)先被保留，這意味著很多在反相色譜里保留很弱的物質(zhì)可以使用親水作用色譜分離。

親水模式色譜常見的固定相鍵合類型有：純硅膠、氰基、二醇基、酰胺基和兩性離子等。

在HILIC模式下，溶劑極性順序：水>甲醇>乙醇>異丙醇>乙腈>丙酮，在此模式下不建議同時使用水和甲醇作為流動相，因為這兩種溶劑的洗脫能力強。

HILIC模式的保留機理綜合了液液分配、離子交換作用和氫鍵作用，具體如下：

//溶質(zhì)分子首先在主體流動相與色譜填料表面的半固定的高極性水膜之間發(fā)生液液分配；

//次級保留作用包括色譜填料表面硅醇基和/或極性官能團與帶電分析物間發(fā)生的離子交換作用；

//氫鍵作用發(fā)生在帶正電的分析物與帶負電的表面硅醇基之間。

其主要應(yīng)用包括：

1、分離在反相色譜上不保留或保留較弱的化合物；

2、分離正相模式下強保留化合物。

新柱是保存在純乙腈中的，所以小伙伴們拿到色譜柱后需先用純乙腈低流速活化后再使用（若測試方法中使用了含緩沖鹽的流動相，先用70%乙腈水過渡）。

HILIC系列色譜柱的日常維護和保存（建議反沖）：

當色譜柱使用一段時間后，出現(xiàn)壓力升高、峰形異常、柱效降低、分離度下降等異常情形時，先用過渡流動相（70%乙腈）沖洗掉色譜柱中的緩沖鹽，再按照如下方式?jīng)_洗（建議反沖）：

HILIC Amide柱、HILIC-NH₂柱、HILIC-Silica柱