中藥成分液相分析常見問題——前沿峰

1. 柱過載

每一根色譜柱都有其最大樣品承載量，當樣品量過多時會出現(xiàn)超載現(xiàn)象，包括質(zhì)量過載和體積過載。

2.色譜柱損壞

色譜柱在長時間使用之后就會導(dǎo)致硅膠填料的溶解，柱床崩解，從而柱效降低導(dǎo)致峰前沿。

3.峰干擾

兩個化合物共洗脫，即在大峰前有小峰出現(xiàn)，色譜峰沒有分開。

4.樣品溶劑的影響

當樣品溶劑的洗脫能力大大強于流動相時會出現(xiàn)前沿峰。

具體就是說，樣品在色譜柱中均勻的往前移，我們通常會得到呈正態(tài)分布的的峰。當樣品溶液進樣后到達色譜柱的時間比較短，在未被流動相充分稀釋時，由于洗脫能力比較強的樣品溶劑存在，使部分樣品被洗脫的速度加快，快速通過色譜柱，最終導(dǎo)致峰前延。

中藥成分分析項目中，提取溶劑通常為乙醇、甲醇、乙酸乙酯等洗脫強度較強的溶劑，此時易發(fā)生“樣品溶劑的洗脫強度遠遠超過流動相"的情況，為避免前延峰出現(xiàn)，可以用通過“流動相稀釋提取液"或降低“進樣體積"的方式。

色譜條件：

色譜柱：Ultimate^® AKL-C18（4.6×250mm，5μm）。

流速：1.0mL/min；

流動相：甲醇：水=1：1.1；

檢測波長：280nm；

柱溫：30℃；

進樣體積：10μL。

色譜圖：

(1) 標準品

(1) 標準品