液相色譜常見問題和解決方法（上）

1）流動(dòng)相粘度過高、被污染，建議選擇合適的流動(dòng)相和比例，重新配置，用0.45微米濾膜進(jìn)行過濾。

2）流動(dòng)相內(nèi)的緩沖鹽引起單向閥堵塞，將流速設(shè)定在5mL/min，擰松排氣閥并purge。

3）泵內(nèi)有氣體，將流速設(shè)定在5mL/min，擰松排氣閥并purge。

4）高壓密封墊變形，建議更換新的高壓密封墊。

1）泵內(nèi)有空氣，解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣，對(duì)溶劑進(jìn)行脫氣處理。

2）比例閥失效，更換比例閥即可。

3）泵密封墊損壞，更換密封墊即可。

4）溶劑中的氣泡，解決的辦法是對(duì)溶劑脫氣，必要時(shí)改變脫氣方法。

5）系統(tǒng)檢漏，找出漏點(diǎn)，密封即可。

6）梯度洗脫，這時(shí)壓力波動(dòng)是正常的。

柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問題，您可按下面步驟檢查問題的起因：

1）拆去保護(hù)預(yù)柱，看柱壓是否還高，否則是保護(hù)柱的問題，若柱壓仍高，再檢查。

2）把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降，否則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查。

3）將柱子的進(jìn)出口反過來(lái)接在儀器上，用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子，（此時(shí)不要連接檢測(cè)器，以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)池）。這時(shí)，如果柱壓仍不下降，再檢查。只用于使用過的柱子。

4）更換柱子入口篩板，若柱壓下降，說明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì)，正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高，請(qǐng)與廠商聯(lián)系。一般情況下，在進(jìn)樣器與保護(hù)柱之間接一個(gè)在線過濾器便可避免柱壓過高的問題。

 5）進(jìn)樣器堵塞，用注射器抽取適量純凈水(多于定量環(huán)體積)，注入進(jìn)樣口，從廢液瓶流出，重復(fù)5次。

平頭峰：

1）檢測(cè)池污染，清洗檢測(cè)池。

2）紫外燈性能極限或故障，更換性能更強(qiáng)的紫外燈。

3）進(jìn)樣量過大，減少進(jìn)樣量。

分叉峰：

1）保護(hù)柱被污染，更換新的保護(hù)柱。

2）色譜柱被污染，對(duì)色譜柱沖洗過夜。

3）進(jìn)樣閥被污染，用注射器抽取適量純凈水（多于定量環(huán)體積），注入進(jìn)樣口，從廢液瓶流出，重復(fù)5次。

4）檢測(cè)池被污染，清洗檢測(cè)池。

5）溶劑選擇不合理，合理選擇溶劑。

6）進(jìn)樣量過大，減少進(jìn)樣量。

 拖尾峰：

1）色譜柱被污染，更換新的色譜柱。

2）進(jìn)樣量過大，減少進(jìn)樣量。

3）流動(dòng)相配比不合理，用合理的配比制造流動(dòng)相。

4）流動(dòng)相流速不合理，合理調(diào)節(jié)流動(dòng)相流速。

5）色譜柱選擇不合理，選擇合適的色譜柱。

6）樣品不純，對(duì)樣品進(jìn)行純化。

 伸舌峰：

1）柱溫過低，合理調(diào)節(jié)柱溫。

2）溶劑并非流動(dòng)相，用流動(dòng)相溶解樣品。

3）流動(dòng)相配比不合理，用合理的配比樹造流動(dòng)相。

4）流動(dòng)相流速不合理，合理調(diào)節(jié)流動(dòng)相流速。